Сайт издательства «Медиа Сфера»
содержит материалы, предназначенные исключительно для работников здравоохранения. Закрывая это сообщение, Вы подтверждаете, что являетесь дипломированным медицинским работником или студентом медицинского образовательного учреждения.

Исакова Ж.Т.

Институт молекулярной биологии и медицины, Бишкек, Кыргызская Республика

Талайбекова Э.T.

Институт молекулярной биологии и медицины, Бишкек, Кыргызская Республика

Исабаева Д.И.

Кыргызская государственная медицинская академия, Бишкек

Лунегова О.С.

Национальный центр кардиологии и терапии, Бишкек, Кыргызская Республика

Керимкулова А.С.

Национальный центр кардиологии и терапии, Бишкек, Кыргызская Республика

Асамбаева Д.А.

Институт молекулярной биологии и медицины, Бишкек, Кыргызская Республика

Алдашев А.А.

Институт молекулярной биологии и медицины, Бишкек, Кыргызская Республика

Ассоциация полиморфного маркера Glu23Lys гена KCNJ11 с сахарным диабетом 2-го типа в кыргызской популяции

Авторы:

Исакова Ж.Т., Талайбекова Э.T., Исабаева Д.И., Лунегова О.С., Керимкулова А.С., Асамбаева Д.А., Алдашев А.А.

Подробнее об авторах

Журнал: Проблемы эндокринологии. 2015;61(5): 26‑29

Просмотров: 222

Загрузок: 3

Как цитировать:

Исакова Ж.Т., Талайбекова Э.T., Исабаева Д.И., Лунегова О.С., Керимкулова А.С., Асамбаева Д.А., Алдашев А.А. Ассоциация полиморфного маркера Glu23Lys гена KCNJ11 с сахарным диабетом 2-го типа в кыргызской популяции. Проблемы эндокринологии. 2015;61(5):26‑29.
Isakova ZhT, Talaibekova ET, Isabaeva DI, Lunegova OS, Kerimkulova AS, Asambaeva DA, Aldashev AA. Polymorphisms Glu23Lys of KCNJ11 gene are associated with Type 2 diabetes in the Kyrgyz Population. Problemy Endokrinologii. 2015;61(5):26‑29. (In Russ.).

?>

В последние 10 лет в Кыргызской Республике, как и других странах, отмечается тенденция к росту числа больных сахарным диабетом 2-го типа (СД2). Согласно официальным данным республиканского медико-информационного центра Министерства здравоохранения, в 2013 г. в Кыргызстане зарегистрировано 15 566 случаев СД2 среди мужчин и 26 506 — среди женщин. В 2014 г. заболеваемость СД2 возросла, составив у мужчин — 16 997, у женщин — 27 218 случаев.

СД2 — многофакторное заболевание, развитие которого зависит от образа жизни (высококалорийное питание, низкая физическая активность, ожирение, хронические стрессы) и наследственной предрасположенности [1]. В настоящее время выявлено несколько десятков генов-кандидатов, ассоциированных с риском развития СД2 [2]. В качестве одного из генов-кандидатов предрасположенности к СД2 рассматривается ген KCNJ11 (potassium channel, inwardly rectifying subfamily J, member 11). Ген KCNJ11, расположенный на 11 хромосоме (11p15.1), кодирует состоящий из 390 аминокислотных остатков белок Kir 6.2, который вместе с рецептором к сульфонилмочевине в β-клетках поджелудочной железы формирует АТФ-зависимый калиевый канал и участвует в глюкозо-стимулированной секреции инсулина [3]. Поступление глюкозы в β-клетку с помощью глюкозного транспортера GLUT-2 приводит к увеличению уровня АТФ и к закрытию АТФ-зависимых калиевых каналов. Последнее ведет к деполяризации клеточной мембраны, открытию кальциевых каналов и усиленному притоку Ca++ внутрь клетки. Повышение концентрации внутриклеточного Ca++ стимулирует слияние инсулинсодержащих гранул с мембраной и выход инсулина из β-клетки путем экзоцитоза [4].

Полиморфизм Glu23Lys (rs5219), расположенного в первом экзоне гена KCNJ11, обусловлен заменой нуклеотида гуанина на аденин (G→A), которая приводит к аминокислотной замене глютаминовой кислоты на лизин в 23-м положении (Glu23→Lys) белка Kir 6.2. Предполагается, что при такой замене с изменением структуры белка нарушается функционирование АТФ-зависимого калиевого канала и не происходит секреции инсулина в кровоток, что ведет к хронической гипергликемии и развитию СД2 [5].

В крупных метаанализах исследований, проведенных в азиатских и европейских популяциях, установлено, что носители аллеля 23Lys гена KCNJ11 имеют повышенный риск развития СД2 [6, 7].

Этнический фактор, климатогеографические условия проживания, характер питания значительно влияют на различия в частотах аллелей полиморфных маркеров и соответственно на общий генетический риск заболевания, в связи с чем необходимо выявление генетических маркеров риска развития СД2 в различных этнических группах.

Цель исследования — изучить ассоциацию генотипов и аллелей полиморфного локуса Glu23Lys гена KCNJ11 с развитием СД2 в кыргызской популяции.

Материал и методы

Обследованы 287 человек кыргызской национальности. Из них 178 с установленным диагнозом СД2, согласно критериям ВОЗ (1999) [8]. В группу СД2 вошли 123 (69%) мужчины и 55 (31%) женщин, средний возраст которых на момент обследования составлял 54±6,6 года. Набор пациентов СД2 проводился в отделении общей терапии Национального центра кардиологии и терапии Бишкека и в отделении эндокринологии Национального госпиталя М.З. Кыргызской Республики.

Группу контроля составили 109 практически здоровых лиц без клинических и лабораторных признаков СД2, ожирения, метаболического синдрома, дислипидемии и артериальной гипертензии. Группа контроля представлена 61 (56%) мужчиной и 48 (44%) женщинами (средний возраст 50±8,4 года). У всех пациентов с СД2 и контрольной группы измеряли рост, массу тела, артериальное давление, индекс массы тела, окружность бедер и талии. Забор крови для определения концентраций глюкозы, инсулина, показателей липидного обмена осуществлялся утром натощак после 14-часового голодания. Все участники исследования подписывали информированное согласие на проведение молекулярно-генетических анализов. Протокол исследования одобрен этическим комитетом Национального центра кардиологии и терапии МЗ КР.

ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции. Идентификацию аллелей полиморфного локуса Glu23Lys гена KCNJ11 проводили методом регистрации полиморфизма длин рестрикционных фрагментов (ПДРФ-анализ), согласно протоколу [9]. В качестве праймеров использовали нуклеотидные последовательности 5`-GACTCTGCAGTGA GGCCCTA–3` (прямой праймер) и 5`-ACGTTGC AGTTGCCTTTCTT –3` (обратный праймер). После проведения ПЦР продукты амплификации (размер 210 п.н.) обработывали эндонуклеазой Ban II. После рестрикции получены три генотипа: Glu/Glu — 150+32+28 п.н. (гомозигота дикий тип); Glu/Lys — 178+150+32+28 п.н. (гетерозигота) и Lys/Lys — 178+32 п.н. (гомозигота мутантный тип).

Для оценки соответствия распределений генотипов ожидаемым значениям равновесия Харди—Вайнберга и для сравнения частот генотипов и аллелей в выборках пациентов с СД2 и лиц контрольной группы использовали критерий χ2 Пирсона. Для установления значимых связей между СД2 и носительством сочетаний аллелей и/или генотипов рассчитывали отношение шансов (OR, odds ratio) с указанием 95% доверительного интервала (95% ДИ). Для вычисления отношения шансов использовали онлайн калькулятор (https://www.medcalc.net/tests/odds_ratio.php). Как отсутствие ассоциации рассматривали OR=1; как положительную ассоциацию («предрасположенность») – OR>1; как отрицательную ассоциацию аллеля или генотипа с заболеванием (пониженный риск развития заболевания) считали OR<1. Для всех видов анализа статистически значимым считалось значение р<0,05.

Результаты и обсуждение

Результаты исследования полиморфного маркера Glu23Lys гена KCNJ11 в контрольной группе и у пациентов с СД2 кыргызской популяции представлены в таблице. Распределение частот генотипов полиморфного маркера соответствовало равновесию Харди—Вайнберга (в группе с СД2 χ2=1,27; p=0,259 и в контрольной группе χ2 =2,248; p=0,133).

Ассоциация полиморфного маркера Glu23Lys гена KCNJ11 c CД2 в кыргызской популяции

Как видно из показателей в таблице, частота встречаемости аллеля 23Lys в гетерозиготном и гомозиготном состояниях (Glu23Lys+Lys23Lys) у больных СД2 была выше, чем в группе контроля (χ2=4,09; р=0,043). Риск развития СД2 у носителей аллеля 23Lys увеличивается в 1,46 раза [OR=1,46 (95% ДИ 1,02—2,07); р=0,036]. Гомозиготный генотип Glu23Glu и аллель Glu23 снижают риск развития СД2 [OR=0,61 (95% ДИ 0,37—0,99); p=0,043 для генотипа и OR=0,69 (95% ДИ 0,48—0,98); p=0,037 для аллеля]. Таким образом, в кыргызской популяции полиморфный локус Glu23Lys гена KCNJ11 ассоциирован с развитием СД2. Предрасположенность к СД2 наследуется в соответствии с доминантной и аддитивной моделями наследования признака. У этнических кыргызов аллелем риска развития СД2 в полиморфном локусе Glu23Lys гена KCNJ11 является 23Lys.

Наши результаты согласуются с данными генотипирования больных СД2 азиатской и европейской популяций, где вариантный аллель 23Lys полиморфного локуса Glu23Lys гена KCNJ11 является генетическим маркером риска СД2. Так, носительство аллеля 23Lys повышает риск развития СД2 в китайской [OR= 1,15 (95% ДИ 1,10—1,210; p=0,0001] [10], японской [OR=1,32 (95% ДИ 1,09—1,60); p=0,004] [11], корейской [OR=1,376 (95% ДИ 1,085—1,745); p=0,008] [12] и русской популяциях [OR=1,33 (95% ДИ 1,07—1,72); p=0,013] [13], а также среди англичан [OR=1,23 (95% ДИ 1,12—1,36); p=0,000015] [14], тунисцев [OR=1,29 (95% ДИ 1,15—1,46); p=0,0001] и арабов, проживающих в Тунисской Республике [OR=1,33 (95% ДИ 1,13—1,56); p=0,001] [15], тайваньцев [OR=2,84 (95% ДИ 1,04—7,75); p=0,044] [16], иранцев [OR=2,5 (95% ДИ 1,01—6,14); p=0,048] [9].

Таким образом, данные литературы и результаты наших исследований показывают, что полиморфный локус Glu23Lys гена KCNJ11 является важным генетическим фактором риска развития СД2 как в азиатских, так и в европейских популяциях. Частота встречаемости аллеля риска — 23Lys гена KCNJ11 в кыргызской популяции составляет 0,33 и существенно не отличается от таковой в других азиатских популяциях и среди европейцев (0,34—0,37) [12, 14—17].

Выявление с помощью молекулярно-генетических методов групп лиц повышенного риска развития СД позволяет тщательно проводить диспансерное наблюдение за состоянием их здоровья с целью выявления и своевременной коррекции ранних нарушений углеводного обмена.

Конфликт интересов отсутствует.

Участие авторов:

Концепция и дизайн исследования — Алдашев А.А., Лунегова О.С..

Сбор и обработка материала — Лунегова О.С., Керимкулова А.С., Исабаева Д.И.

Генотипирование — Талайбекова Э.Т., Асамбаева Д.А..

Статистическая обработка данных — Исакова Ж.Т., Талайбекова Э.Т.

Написание текста — Исакова Ж.Т..

Редактирование — Алдашев А.А..

Подтверждение e-mail

На test@yandex.ru отправлено письмо с ссылкой для подтверждения e-mail. Перейдите по ссылке из письма, чтобы завершить регистрацию на сайте.

Подтверждение e-mail