Сравнительная характеристика морфологических параметров лимфоидных структур тонкой кишки крыс до и после воздействия антисептика-стимулятора Дорогова фракции 2 на фоне хронической лучевой болезни

Система пищеварения занимает особое место во взаимоотношениях организма с внешней средой. Различные вещества, входящие в состав пищи, воздействуют на слизистую оболочку органов пищеварительной системы. Слизистая оболочка и подслизистая основа, имеющие собственные лимфоидные образования, являются органами периферического отдела иммунной системы [1, 2].

Одним из ведущих иммунных органов человека является кишечник [3, 4, 5]. Лимфоидная ткань тонкого кишечника, составляющая четверть всей системы иммунитета, — первый элемент иммунной защиты пищеварительного тракта. Сюда же относятся и лимфоидные узелки тонкого кишечника [6, 7].

Радиация представляет собой неблагоприятный фактор, который, воздействуя как на организм в целом, так и на его отдельные функции, вызывает стойкие изменения органов иммунитета, системы крови и т. д. [8].

При исследовании отдаленных последствий хронического облучения установлено, что число и относительное содержание лимфоидных клеток в более радиочувствительной популяции снижается, параллельно растет численность стромальных элементов в наиболее устойчивых к облучению лимфоузлах [9]. Эти данные свидетельствуют о снижении функциональной активности лимфоидной ткани кишки после воздействия хронического облучения [10].

Значение морфологии и биопсии кишечника как объективного показателя диагноза и лечения гастроэнтерологической патологии, обусловленной нарушением функционирования иммунной системы желудочно-кишечного тракта, высоко [11].

Тканевый лекарственный препарат антисептик-стимулятор Дорогова фракции 2 (АСД-ф2) является оригинальным продуктом термического разложения (сухой перегонки) тканей животных (мясокостной муки, мясных и костных отходов убойных цехов биокомбинатов, а также различных органов и тканей животных) [12]. АСД-ф2 оказывает стимулирующее воздействие на биохимические процессы, сопряженные с биологической функцией активных сульфгидрильных групп, и способен интенсифицировать обмен углеводов, липидов, белков.

Препарат вызывает улучшение функционального состояния механизмов естественной резистентности, стимулирует иммуногенез, усиливает процессы регенерации, вследствие чего повышается сопротивляемость тканей к неблагоприятным воздействиям, в том числе к облучению [13].

Углубленное и детальное исследование морфофункциональных особенностей лимфоидных узелков и лимфатического русла тонкой кишки при хроническом облучении позволит научно обоснованно вести коррекцию иммунологических поражений и рационально использовать АСД-ф2 при лечении облученных больных.

Цель исследования — изучение количественного содержания лимфоидных структур тонкой кишки крыс 8-месячного возраста в норме и при воздействии АСД-ф2 на фоне хронической лучевой болезни.

Исследование выполнено на 60 белых рандомбредных крысах самцах с массой от 210 до 280 г, содержавшихся в условиях вивария при стандартном рационе питания, свободном доступе к воде, обычном режиме освещения. Животные были разделены на три группы (n=60): 1-я — интактный контроль (n=20); 2-я — облучение без введения препарата (n=20); 3-я — введение препарата во время облучения (n=20). Для моделирования хронической лучевой болезни производилось облучение крыс аппаратом ДТГТ АГАТ Р1 (завод «Балтиец», Нарва, Эстония), мощностью 25,006 сГр/ мин на протяжении 20 дней в дозе 0,2 Гр (суммарная доза составила 4,0 Гр) до 90-дневного возраста. В качестве препарата использовали АСД-ф2. Животные 3-й группы перорально получали 0,1 мл чистого АСД-ф2 на 0,4 мл дистиллированной воды во время облучения.

Тяжесть органопатологии оценивали по морфологическим показателям (количество сгруппированных лимфоидных узелков, число узелков в них, размеры сгруппированных лимфоидных узелков и размеры лимфоидных узелков в них, общая площадь лимфоидных узелков и ее процентное соотношение с общей площадью кишечника).

Изменения в тонкой кишке в конце эксперимента соответствовали хронической лучевой болезни и коррекции биостимулятором.

Выведение животных из эксперимента проводили через 5 мес (в 240-дневном возрасте) с момента его начала посредством мгновенной декапитации животных под эфирном наркозом. Контролем служили интактные крысы (n=20). На проведение исследования получено разрешение Этического комитета Бухарского государственного медицинского института им. Абу Али ибн Сино (№ 18 от 16.01.18).

Для осуществления морфологического исследования производили мобилизацию брыжейки тонкой кишки (по намеченной линии пересечения кишки) с последующей ее резекцией и рассечением по брыжеечному краю по всей длине микроножницами. После промывки полученных тотальных препаратов тонкой кишки в проточной воде производили их окраску гематоксилином-Н (Гарриса) и просветление 3% уксусной кислотой с последующей повторной промывкой препаратов в дистиллированной воде.

Математическую обработку производили непосредственно из общей матрицы данных Excel 7,0 с привлечением возможностей программы STTGRAPH 5.1, определяли показатели среднеквадратичного отклонения и ошибки репрезентативности.

При морфологическом исследовании лимфатических образований тонкого кишечника интактных крыс были получены морфометрические параметры тонкой кишки по длине и периметру (см. таблицу).

Лимфоидная ткань в слизистой оболочке располагается в виде одиночных и сгруппированных (бляшка) лимфоидных узелков (СЛУ). В сгруппированных узелках лимфоидные узелки отделены друг от друга межузелковой зоной, которые окрашены более темным цветом.

В контрольной группе количество СЛУ на протяжении тонкой кишки колеблется от 9 до 17, в среднем — 13,3±0,50.

На расстоянии 3,5—6 см (в среднем 4,9±0,15 см) от пилорического сфинктера желудка располагается первый СЛУ, который в основном имеет округлую форму. Диаметр первого СЛУ составляет от 0,2×0,2 до 0,5×0,5 см, в среднем — 0,38±0,019 см. Площадь этого СЛУ колеблется от 0,031 до 0,20 см², в среднем — 0,11±0,01 см² (см. таблицу).

В начальном отделе брыжеечной части тонкой кишки в основном наблюдается СЛУ округлой и овальной формы, единично встречается неправильная форма. СЛУ округлой формы имеет размеры от 0,4×0,4 см до 0,6×0,6 см, а овальной находится в пределах от 0,37×0,41 до 0,52×0,58 см. Расстояние межузелковых зон колеблется от 0,005 до 0,01 см.

В структуре СЛУ начального отдела брыжеечной части тонкой кишки преобладают узелки округлой формы (рис. 1),

среди которых встречаются единичные овальные узелки. Диаметр узелков в СЛУ зафиксирован от 0,05 до 0,1 см, в среднем — 0,075±0,003 см.

В средней части брыжеечного отдела тонкой кишки СЛУ в основном имели овальную форму, единично встречается СЛУ округлой или неправильной формы. СЛУ округлой формы имели размеры от 0,4×0,4 до 0,7×0,7 см, а СЛУ овальной формы находились в пределах от 0,4×0,6 до 0,72×0,81 см. Узелки в СЛУ наблюдаются преимущественно округлой формы. Диаметры узелков в СЛУ находятся от 0,05 до 0,1 см, в среднем — 0,08±0,003 см. Расстояние межузелковых зон зафиксировано в пределах 0,005—0,01 см.

В конечном отделе брыжеечной части тонкой кишки СЛУ в основном имеют овальную форму, единично встречается СЛУ округлой формы. Размеры овальных СЛУ находятся в пределах от 0,4×0,6 до 0,6×0,9 см, размеры СЛУ округлой формы варьируют от 0,4×0,4 см до 0,8×0,8 см. Узелки в СЛУ в основном встречаются округлой формы. Диаметр узелков в СЛУ варьирует от 0,05 до 0,15 см, в среднем — 0,09±0,006 см. Расстояние межузелковых зон находится в пределах 0,005—0,01 см.

При моделировании хронической лучевой болезни на 240-е сутки эксперимента было установлено, что длина тонкой кишки облученных крыс находится в пределах от 87 до 108 см, в среднем — 98,0±1,3 см (см. таблицу). На расстоянии 1,8—5,6 см (в среднем 3,1±0,2 см) от пилорического сфинктера желудка располагается первый СЛУ, который в основном имеет округлую форму. Диаметр первого СЛУ колеблется от 0,3×0,3 до 0,4×0,4 см, в среднем — 0,37±0,01 см. Площадь этого СЛУ составляет от 0,071 до 0,126 см², в среднем — 0,1±0,03 см².

В начальном отделе брыжеечной части тонкой кишки СЛУ в основном имели округлую и овальную формы, единично встречается неправильная форма. СЛУ округлой формы имеет размеры от 0,3×0,3 см до 0,4×0,4 см, а овальной — в пределах от 0,20×0,32 до 0,37×0,50 см. Расстояние межузелковых зон колеблется от 0,007 до 0,01 см. Узелки в СЛУ в основном представлены округлой и неправильной формами (рис. 2),

имеются единичные узелки овальной формы. Диаметр узелков в СЛУ находится в пределах от 0,06 до 0,15 см, в среднем — 0,1±0,01 см.

СЛУ в средней части брыжеечного отдела тонкой кишки в основном имеют округлую и неправильную формы, единично встречается СЛУ овальной формы. Размеры СЛУ округлой формы составляли от 0,4×0,4 см до 0,75×0,75 см, а овальной — в пределах от 0,37×0,50 до 0,46×0,82 см. Узелки в СЛУ наблюдаются в основном округлой формы. Диаметры узелков в СЛУ — от 0,06 до 0,15 см, в среднем — 0,1±0,01 см. Расстояние межузелковых зон составляет 0,007—0,01 см.

В конечном отделе брыжеечной части тонкой кишки СЛУ в основном имеют округлую форму, единично встречается СЛУ овальной формы. Размеры округлых СЛУ находятся в пределах от 0,4×0,4 до 0,9×0,9 см, размеры СЛУ овальной формы варьируют от 0,3×0,5 до 0,5×0,7 см.

Узелки в СЛУ в основном встречаются округлой формы. Диаметр узелков в СЛУ находится в пределах от 0,98 до 1,9 см, в среднем — 1,02±0,06 см. Расстояние межузелковых зон составляет 0,03—0,06 см. Диаметры единичных узелков — от 0,7—1,0 см до 2,0—2,5 см.

У крыс, принимавших АСД-ф2 во время облучения, длина тонкой кишки колеблется от 93 до 106 см, в среднем — 99,8±0,68 см (см. таблицу).

На расстоянии 3,0—11,5 см (в среднем 8±0,5 см) от пилорического сфинктера желудка располагается первый СЛУ, имеющий в основном овальную форму. Диаметр первого СЛУ колеблется от 0,3 до 0,5 см, в среднем — 0,4±0,01 см. Площадь этого СЛУ варьирует от 0,075 до 0,23 см², в среднем — 0,1±0,01 см².

В начальном отделе брыжеечной части тонкой кишки зафиксированы СЛУ в основном овальной формы, единично встречаются СЛУ округлой и неправильной формы. СЛУ овальной формы имеет размеры от 0,036×0,04 до 0,028×0,05 см. Расстояние межузелковых зон между краевыми узелками колеблется от 0,002 до 0,01 см, а от центрального узелка к краевым — в пределах 0,12—0,15 см.

В структуре СЛУ начального отдела брыжеечной части тонкого кишечника преобладают узелки овальной формы (рис. 3),

среди которых встречаются единичные узелки округлой формы. Диаметр узелков в СЛУ составляет от 0,04 до 0,6 см, в среднем — 0,27±0,03 см.

В средней части брыжеечного отдела тонкой кишки СЛУ в основном имели овальную форму, единично встречаются СЛУ округлой формы и множество единичных узелков. СЛУ округлой формы имели размеры от 0,4×0,4 до 1,0×1,0 см, а СЛУ овальной формы находились в пределах от 0,24×0,49 до 0,33×0,6 см.

Узелки в СЛУ в основном наблюдаются овально-округлой формы. Диаметр узелков в СЛУ составляет от 0,07 до 0,16 см, в среднем — 0,115±0,006 см. Расстояние межузелковых зон между краевыми узелками колеблется от 0,003 до 0,02 см, а от центрального узелка к краевым — в пределах 0,11—0,16 см.

В конечном отделе брыжеечной части тонкой кишки СЛУ в основном имеют округлую форму, единично встречаются СЛУ овальной формы. Размеры округлых СЛУ находились в пределах от 0,5×0,5 до 1,0×1,0 см, размеры СЛУ овальной формы варьируют от 0,5×0,7 до 0,8×1,2 см.

Узелки в СЛУ в основном зафиксированы округлой формы. Диаметр узелков в СЛУ составляет от 0,07 до 0,14 см, в среднем — 0,095±0,004 см. Расстояние межузелковых зон между краевыми узелками колеблется от 0,001 до 0,03 см, а от центрального узелка к краевым — в пределах 0,1—0,13 см.

Таким образом, у контрольной группы крыс СЛУ имели в основном округлую (46,2%) или овальную (51,2%), редко неправильную или четырехугольную (2,6%) форму; у облученных животных — в основном округлую (52,5%) и неправильную (34,2%), реже овальную (13,3%) форму. При коррекции АСД-ф2 во время облучения СЛУ имели почти одинаковую форму с контрольной группой.

При моделировании хронической лучевой болезни на 240-е сутки эксперимента было выявлено достоверное снижение количества СЛУ у облученных крыс по сравнению с таковыми показателями у интактных животных, при этом число узелков в них и размеры СЛУ относительно увеличиваются от начального отдела тонкой кишки к конечному.

Форма СЛУ у крыс экспериментальной группы, в отличие от контрольной, по продвижению от начальной части к конечной части тонкой кишки меняется от овальной к округлой и неправильной.

При коррекции АСД-ф2 происходит восстановление бляшек из неправильной в округлую или овальную форму, а также обнаруживается увеличение количества одиночных узелков, чего не наблюдалось у облученной и здоровой групп животных.

В среднем 2,25% площади тонкой кишки облученных крыс покрыто сгруппированными лимфатическими узлами, в отличие от здоровой — 2,81%, при коррекции посредством АСД-ф2 исследуемая площадь составила 2,67%.

Приведенные факты косвенно свидетельствуют о снижении показателей лимфоидной ткани кишки после воздействия хронического облучения и приближении к нормальным параметрам под влиянием АСД-ф2.

Сведения об авторах

Тешаев Ш.Ж. — проф.; https://orcid.org/0000-0002-2089-5492; e-mail: teshayev@mail.ru

Хасанова Д.А. — базовый докторант кафедры; https://orcid.org/0000-0003-0433-0747; e-mail: hasanova_dilnoz@mail.ru

Автор, ответственный за переписку: Тешаев Шухрат Жумаевич — https://orcid.org/0000-0002-2089-5492; e-mail: teshayev@mail.ru

Как цитировать:

Тешаев Ш.Ж., Хасанова Д.А. Сравнительная характеристика морфологических параметров лимфоидных структур тонкой кишки крыс до и после воздействия антисептика-стимулятора Дорогова фракции 2 на фоне хронической лучевой болезни. Оперативная хирургия и клиническая анатомия (Пироговский научный журнал). 2019;3(2):19-24. https://doi.org/10.17116/operhirurg2019302119