Разработка панели образцов для контроля качества ВПЧ-тестирования на основе жидкостной технологии

В настоящее время, ВПЧ-тестирование широко используется в программах скрининга онкологической патологии шейки матки во всем мире. Это обусловлено значительно более высокой чувствительностью ВПЧ-теста в выявлении предраковых заболеваний. Однако относительно низкая специфичность ВПЧ-теста, вследствие частого транзиторного течения ВПЧ-инфекции, не позволяет использовать этот тест в скрининге как самостоятельный без дополнительной сортировки с помощью других методов — цитологического исследования (ПАП-теста), выявление клеточных онкобелков и др. Во всем мире, (а в последние годы и в Российской Федерации) в программы цервикального скрининга активно внедряются жидкостные технологии, для которых материал из шейки матки помещают в спиртосодержащую среду. Это обеспечивает длительную сохранность клеток, улучшает качество приготовления препаратов для ПАП-теста и дает возможность тестирования на ВПЧ без дополнительного взятия клинического образца у пациентки. Для проведения внешнего контроля качества лабораторных исследований используются контрольные образцы, приближенные к клиническим образцам. Так, например, некоторые образцы для ВПЧ-тестирования панели QCMD составлены из сборных клинических образцов в спиртосодержащей среде. Цель исследования — разработать панель контрольных образцов, содержащих клеточный материал в спиртосодержащей среде по аналогии с панелью QCMD. Клинические образцы, собранные в спиртосодержащую среду BD Sure Path, тестировали индивидуально на наличие ВПЧ — 14 типов (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 51, 56, 58, 59, 66 и 68), с помощью наборов реагентов АмплиСенс ВПЧ ВКР скрин-титр-FL и АмплиСенс ВПЧ ВКР генотип-титр-FL (производства ФБУН «ЦНИИ эпидемиологии»). ДНК из жидкостных образцов извлекали с помощью набора реагентов ДНК-сорб-Д. Образцы сортировали по результатам тестирования и собирали в пулы в соответствие с выявленными типами. Концентрацию ДНК ВПЧ в пулах доводили до заданных значений, добавляя к ним пулы ВПЧ-негативных образцов. Итого было получено 20 ВПЧ-негативных пулов (по 1000 мл) и 17 ВПЧ-позитивных пулов, содержащих различные типы ВПЧ. Для дальнейшего тестирования образцы тщательно перемешивали и раскапывали по 5 мл в полипропиленовые пробирки с завинчивающейся крышкой или по 10 мл в контейнеры BD Sure Path. Планируется протестировать контрольные образцы в различных лабораториях, использующих ВПЧ-тесты АмплиСенс для жидкостных образцов, а также с помощью других ВПЧ-тестов, адаптированных для работы с жидкостными образцами.