Технология приготовления тестовых реагентов для определения трансфузионноопасного антигена КEL1 (Kell)

Большинство гетерогибридомных моноклональных антител (ГМКАТ) к минорным трансфузионноопасным антигенам эритроцитов, в частности, ГМКАТ анти-K (Kell) не агглютинируют эритроциты в обычных условиях (в солевой среде на плоскости при комнатной температуре) в силу своих структурных особенностей. В связи с этим такие ГМКАТ остаются невостребованными при производстве диагностических реагентов. Целью работы являлся подбор условий, при которых ГМКАТ анти-K приобретают способность агглютинировать К-положительные эритроциты на плоскости при комнатной температуре. Данная цель была достигнута путем добавления различных коллоидных и/или кристаллоидных растворов к растворам ГМКАТ анти-К. Использовали несколько серий концентрированных ГМКАТ анти-К, которые разводили коллоидными (желатин 1—5%, декстраны 40—80 кДа, полисахароза 400, поливинилпирролидон 40—60 кДа) и/или кристаллоидными растворами различной ионной силы, а также буферными растворами с рН 4—9. Результат оценивали по времени появления и выраженности агглютинации эритроцитов на плоскости при комнатной температуре. В качестве контроля использовали реагенты для экспресс-определения антигена KEL1 зарубежных производителей. Наилучшие результаты (время появления агглютинации до 15 с, выраженность агглютинации не менее 3+) получены при комбинации ГМКАТ с коллоидными компонентами в концентрации 2—6%, кристаллоидными 1—5% в конечном реагенте, при рН 5—8. Таким образом, предложена технология приготовления из неиспользуемого сырья диагностических реагентов, не уступающих по своим иммуносерологическим свойствам зарубежным аналогам.