Изучение электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия при ортопедическом лечении пациентов различными видами базисных пластмасс

В настоящее время в ортопедической стоматологии применяется большое число различных видов базисных пластмасс. Однако влияние базисных пластмасс на ткани слизистой оболочки полости рта и организм пациентов в целом остается не до конца изученными. Известно, что метод изучения электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия все шире применяется в стоматологии (Хетагуров В.В., 2002). В связи с наличием надежных корреляций между чувствительностью клеток организма человека к различным химическим агентам мы провели оценку влияния различных базисных материалов непосредственно на клетках-эукариотах.

Цель исследования — изучение влияния различных базисных пластмасс на ткани слизистой оболочки полости и организм пациентов в целом методом изучения электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия.

Материал и методы. Для достижения нашей цели мы использовали метод изучения электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия. В основу этой методики положены три фактора: 1) физический — наличие поверхностного заряда и электрокинетического потенциала у клеток-эукариотов; 2) биофизический — под влиянием внешнего электрического поля ядра клеток могут совершать определенный дрейф в сторону того или иного электрода; 3) способность суммарного заряда ядерной мембраны (а следовательно, и потенциала) подвергаться изменениям (вплоть до изменения знака поверхностного заряда) под влиянием внешних факторов. Так как изменения потенциала и электрофоретических свойств ядер, в зависимости от возраста, локализации клетки, физиологического состояния субъекта хорошо изучены и являются контролируемыми факторами, мы использовали оценку изменений электрофоретических свойств ядер буккального эпителия человека методом клеточного микроэлектрофореза для дифференциальной диагностики влияния базисных материалов на организм пациентов. Исследовали буккальный эпителий человека, получаемый от больного путем соскоба стерильным медицинским шпателем со слизистой оболочки щеки в области жевательных зубов. Данная процедура взятия образца совершенно безболезненна и бескровна. Исследуемый материал помещали между двумя покровными стеклами с добавлением 0,02 мл дистиллированной воды. При необходимости хранили препарат во влажной среде при температуре 3—4 °С до 2—3 сут. В работе использовали предметные стекла, бинокулярный микроскоп, пипетки автоматические с наконечниками, установку для внутриклеточного микроэлектрофореза, включающую измерительную ячейку, плоскую камеру с двумя платиновыми электродами или электродами из нержавеющей стали, блок питания — электронный стабилизатор (сила тока не более 1 мА), переменное выходное напряжение (5 Гц) — не более 50 В, и коммутатор с автоматическим переключателем полярности. Электрокинетическая подвижность ядер является интегральной характеристикой, зависящей от синтетической активности ядра, фазового состояния цитоплазмы, ионного и водного баланса в непосредственной близости к ядру. В качестве критериев оценки использовали изменения в характере движения ядер клеток. Оценивали направление смещения и относительные доли ядер с анионоидными и катионоидными смещениями. Оценивался также параметр амплитуды смещения. Для оценки полученных результатов проводился расчет коэффициента, учитывающего изменения доли подвижных ядер и амплитуды их смещения в переменном электрическом поле: К=√(S² + δ²), где S — средняя величина смещения клеток в препарате, δ — дисперсия: рассеяние ядер по величине смещения в полном диапазоне.

Исследование проводили в лаборатории молекулярной микроэкологии Московского НИИ эпидемиологии и микробиологии (МНИИЭМ) им. Н.Г. Габричевского, ООО НИФ «Ультрасан». Исследования провели у 21 больного. Соскобы брали до лечения съемными зубными протезами из базисных пластмасс «Бесцветная», фторакс, стомакрил, а также после 6 мес пользования полными съемными зубными протезами из разных базисных пластмасс. Всего провели 42 исследования. Известно, что изменение электрофоретических свойств ядер клеток буккального эпителия, а также способность суммарного заряда ядерной мембраны подвергаться изменениям под влиянием внутренних и внешних факторов, в том числе и проводимого лечения, дает возможность судить о степени нарушения гомеостаза и функционального состояния не только эпителиальных тканей полости рта, но и оценивать общее состояние больного, эффективность проводимого лечения. По данным авторов метода (В.Г. Шахбазов, Т.В. Колупаева, А.Л. Набоков, 1986), коэффициент электрокинетической подвижности ядер клеток буккального эпителия у пациентов в возрасте 55—70 лет в норме составляет 60—70 баллов. В этом случае цитологическая картина клеток соответствует морфологической норме. При значении коэффициента электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия 30—60 баллов цитологически наблюдается нарушение проницаемости клеточной стенки, повышенная зернистость цитоплазмы, пикноз клеточных ядер у 20—40% клеток. При низких значениях коэффициента 25—30 наблюдаются значительные морфологические изменения клеток: нарушение проницаемости клеточной стенки (сжатие клеток, разрывы клеточной мембраны), пикноз или гипертрофия клеточных ядер.

Результаты. Результаты проведенных исследований показали, что у пациентов до проведения ортопедического лечения электрофоретическая подвижность клеток ядер буккального эпителия составляла в среднем 40±2 балла. В 52% случаев при использовании базисной пластмассы стомакрил нами была выявлена положительная динамика. Так, коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток эпителия щеки после ортопедического лечения возрос и составил 60±2 балла у 28% пациентов, 50±2 балла у 24% пациентов. В 42% случаев коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия не изменился и лишь в 6% случаев коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия снизился до 32±2 балла. У больных, протезы которым были изготовлены из пластмассы «Бесцветная», коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия после лечения составил 60±2 балла в 22% случаев, 50±2 балла у 25% пациентов, в 43% случаев коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия не изменился. Отмечали в 10% случаев падение коэффициента электрофоретической подвижности ядра клеток щеки до 32±2 балла. После ортопедического лечения съемными зубными протезами из базисной пластмассы фторакс коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток эпителия щеки составлял 60±2 балла в 15% случаев, 50±2 балла у 26% пациентов, в 44% случаях коэффициент электрофоретической подвижности ядер клеток буккального эпителия практически не изменился и составил 40±2. Отмечали падение коэффициента электрофоретической подвижности ядер клеток щеки до 32±2 в 10% случаев, 22±2 балла также в 10% случаев.

Вывод. Результаты проведенного нами электрофоретического исследования подвижности ядер клеток буккального эпителия пациентов со сьемными зубными протезами, изготовленными из различных базисных пластмасс, показали наиболее благоприятное влияние на ткани протезного ложа и организм пациентов в целом базисной пластмассы стомакрил.