Клинический опыт применения аутофлюоресцентной визуализации для выявления заболеваний слизистой оболочки рта

Ежегодно в России регистрируется около 6000 первичных больных раком полости рта, из них в Москве — от 360 до 400 пациентов. У 70% рак слизистой оболочки рта (СОР) и отоларингеальной области выявляется в поздних стадиях [2]. Ранняя диагностика позволяет уменьшить смертность от злокачественных новообразований слизистой оболочки рта на 80%, поэтому необходим поиск новых современных скрининговых методов выявления предраковых заболеваний СОР на стадии бессимптомного рака (Shingaki S. и соавт., 2003).

Высокую чувствительность в обнаружении предрака и ранних форм рака слизистых оболочек полых органов показал метод аутофлюоресцентной диагностики (АФД) [3, 4], основанный на различиях в интенсивности и спектральном составе аутофлюоресцентного излучения нормальной и патологической ткани. Как показали клинические исследования, в месте перерождения эпителия наблюдается резкое уменьшение интенсивности ауто­флюоресцентного излучения на фоне окружающей здоровой ткани. Этот эффект, который получил название эффекта «темного пятна», наблюдается при аутофлюоресцентной визуализации, т.е. осмотре слизистых оболочек в свете их аутофлюоресцентного излучения, которое возникает при освещении поверхности излучением в области 380—460 нм.

Исследования в области АФД рака СОР проводились за рубежом с привлечением различных методологических подходов и аппаратуры [7]. Показано, что в очагах предрака и раннего рака СОР также происходит уменьшение интенсивности аутофлюоресцентного излучения в спектральной области 360—600 нм [5]. На основе этого феномена был создан прибор VELscope, который применяется в США, Канаде и других странах в онкоскрининге СОР [6].

В настоящей работе представлены результаты клинического применения отечественной аппаратуры для АФД заболеваний СОР. Методом аутофлюоресцентной визуализации и локальной флюоресцентной спектроскопии изучены особенности аутофлюоресцентного излучения очагов предрака, рака и здоровой СОР.

Материал и методы. Для аутофлюоресцентной визуализации СОР использовали комплект АФС-Д, который состоит из аппарата медицинского назначения АФС-400 (Регистрационное удостоверение №ФСР 2011/106669) и специально подобранных светофильтров. Аппарат АФС-400 включает светодиоды с длиной волны излучения 400±10 нм. При освещении полости рта аппаратом АФС-400 излучение с длиной волны 400 нм эффективно поглощается эндогенными флюорофорами СОР, в результате чего возникает ее аутофлюоресцентное излучение. Входящие в состав комплекта специальные очки позволяют визуально наблюдать возникающее излучение и выявлять очаги аномального свечения. Для объективизации визуальных оценок с использованием компьютеризованной спектрально-флюоресцентной диагностической установки Спектр-Кластер проводили измерения спектров лазериндуцированной аутофлюоресценции в диапазоне 420—750 нм (длина волны возбуждения 405 нм). Измерения проводили в участках патологии и визуально-здоровой СОР с помощью волоконно-оптического зонда, разработанного для стоматологического применения. Исследование было проведено в группе пациентов (n=24) в возрасте от 25 до 80 лет, включая 11 пациентов с веррукозной лейкоплакией, 8 пациентов с плоским лишаем (эрозивно-язвенная форма), 2 пациентов с плоским лишаем (гиперкератотическая форма). У 3 пациентов заболевание находилось в стадии ремиссии. У 3 пациентов морфологически был подтвержден плоскоклеточный рак (I стадия).

Результаты. При освещении светодиодным аппаратом АФС-400 здоровая слизистая оболочка щеки, мягкого и твердого неба, языка имела зеленое свечение. Очаги воспаления (парадонтиты, гингивиты) имели красное свечение, обусловленное наличием эндогенных порфиринов как продуктов жизнедеятельности патогенной микрофлоры. Эндогенное флюоресцентное свечение очагов веррукозной лейкоплакии и плоского лишая значительно отличалось от свечения здоровой СОР. Очаги предрака визуализировались в виде темных участков, без видимого свечения, либо их свечение имело красновато-коричневый или розовый оттенок. Очаги, находящиеся в стадии ремиссии, также имели зеленоватое свечение, поэтому они не выявлялись на фоне здоровой СОР.

Визуальные оценки были полностью подтверждены данными локальной флюоресцентной спектроскопии [1]. В спектрах здоровой СОР регистрировались широкие полосы излучения с максимумом в зеленой области. В очагах предрака регистрировалось достоверное и воспроизводимое уменьшение (до 10 раз) спектральной интенсивности в диапазоне 450—600 нм. Кроме того, у многих пациентов регистрировались полосы флюоресценции эндогенных порфиринов, в результате чего свечение очагов предрака приобретало розовато-красноватый оттенок. У 3 пациенток с морфологически подтвержденным плоскоклеточным раком также были выявлены значительные различия. У 2 пациенток пожилого возраста эпителиальные карциномы слизистой оболочки щеки и альвеолярного отростка имели интенсивную красную флюоресценцию или неоднородное розовое свечение с очагами яркой красной флюоресценции. При спектральной верификации в очагах рака регистрировалось резкое снижение интенсивности основной полосы излучения в области 450—600 нм и интенсивные полосы флюоресценции эндогенных порфиринов в красной области спектра. При цитологическом исследовании у обеих пациенток в препарате обнаруживалась смешанная микрофлора, что, возможно, объясняет наличие красной флюоресценции эндогенных порфиринов. У третьей пациентки (30 лет) очаг поражения на твердом небе визуализировался в виде темного пятна с четкими неровными границами на фоне зеленой флюоресценции нормальной слизистой оболочки неба. При спектральной верификации в очаге рака регистрировалось резкое уменьшение интенсивности аутофлюоресценции во всем спектральном диапазоне (430—700 нм) относительно окружающей здоровой ткани.

Вывод. В данной работе впервые в нашей стране была проведена АФД предраковых и раковых заболеваний СОР. Данное исследование показало, что использование отечественной диагностической аппаратуры позволяет проводить аутофлюоресцентную визуализацию СОР, обнаруживать различия в свечении здоровой СОР и патологических очагов и на основании наблюдаемых различий выявлять очаги предрака и рака СОР. Комплект АФС-Д отличается надежностью и простотой в эксплуатации, для его применения не требуется дорогостоящих реактивов и комплектующих. В этой связи аутофлюоресцентная визуализация СОР с использованием диагностического комплекта АФС-Д может рассматриваться как новое перспективное направление онкоскрининга в отечественной стоматологии.