Преимущество ПЦР-исследования при диагностике респираторной аденовирусной инфекции

Аденовирус человека является одним из основных этиологических факторов групповых заболеваний ОРВИ в организованных детских и воинских коллективов, вызывает в ряде случаев респираторную инфекцию тяжелого течения, в том числе с летальными исходами. В настоящий момент в ряде лабораторий для диагностики респираторной аденовирусной инфекции используют методы иммуноферментного анализа для обнаружения антител к антигенам аденовируса и ПЦР для обнаружения его ДНК. Сравнение диагностической ценности этих методов в России еще не проводилось. Тот факт, что более чем у 40% детей к 6-летнему возрасту обнаруживаются специфические антитела к аденовирусу, позволяет предполагать возможность гипердиагностики аденовирусной инфекции при исследовании одиночной сыворотки за счет анамнестических антител. Цель исследования: оценить диагностическую значимость обнаружения специфических антител классов M, A, G к аденовирусу в парных и одиночных сыворотках методом ИФА путем определения диагностических чувствительности (ДЧ) и специфичности по сравнению c выявлением ДНК аденовируса (Adv) видов B, C, E в респираторном тракте методом ПЦР. Для оценки ДЧ использовались собранные во время вспышек ОРЗ мазки из носоглотки и парные сыворотки, на 1—10-й день (первая) и 6—30-й день (вторая) от 80 военнослужащих с клинической картиной аденовирусного заболевания. Для оценки специфичности исследовали образцы мокроты и одиночные сыворотки 23 больных ОРЗ взрослых и одиночные сыворотки 83 условно-здоровых детей. В респираторных образцах определяли ДНК Adv методом ПЦР с использованием наборов реагентов «АмплиСенс» (ЦНИИЭ, Москва). Секвенированием участка гена гексона определяли принадлежность аденовирусов к определенному серотипу. В сыворотках крови определяли антитела к Adv классов M, A, G с помощью наборов Anti-Adenovirus ELISA (IgG/IgM/IgA) («Euroimmun», Германия). Исследование сывороток (одиночных и парных) проводили одновременно (в одном опыте). Для диагностики острой инфекции диагностически значимым считали обнаружение IgM и IgA, и увеличение количества IgG в 2 и более раз во второй сыворотке по сравнению с первой. У военнослужащих срочной службы методом ПЦР обнаружены ДНК Adv 4, 7 и 55 серотипов. Серологическое исследование сывороток, взятых в период разгара заболевания, выявило наличие диагностических концентраций специфических к Adv IgM в 0%, IgA — в 36,25%, Ig G — в 98,75% случаях. По данным производителя тест-системы IgG обнаруживаются у 64,3% здоровых взрослых. В этой связи диагностическое значение может иметь только динамика концентрации IgG. Диагностическое повышение концентрации IgG во второй сыворотке по сравнению с первой было зарегистрировано только у 32,5% обследованных больных аденовирусной инфекцией. При сравнении результатов ИФА с частотой выявления ДНК Adv в ПЦР диагностическая чувствительность обнаружения Ig A, M, G к Adv составила 57,5%. В респираторном тракте 23 взрослых больных ОРЗ, у которых, ДНК Adv не была обнаружена, верифицированы другие вирусные или бактериальные возбудители инфекции. Диагностические титры IgG против Adv определены у этих больных в 65% случаев, а IgM и IgA отсутствовали. В группе условно-здоровых детей диагностические титры Ig G к Adv выявлены в сыворотках в 55,4% случаев, IgA — в 7,2%, IgM — в 3,6%. Таким образом, определение специфических антител для диагностики острой респираторной Adv-инфекции у взрослых нецелесообразно в связи с его низкой (57,5%) ДЧ по сравнению c обнаружением ДНК Adv в ПЦР. Использование ИФА для диагностики респираторной Adv-инфекции у детей в одиночных сыворотках может приводить к ложноположительным результатам, так как IgM и IgA выявляются у 10,9% условно-здоровых детей. Тестирование только одиночных сывороток для определения IgG может приводить к гипердиагностике Adv инфекции, поскольку IgG обнаруживаются у 55,4% условно-здоровых детей и 65% взрослых.