Оценка гемолиза in vivo и in vitro на преаналитическом этапе

Основная цель лабораторных исследований состоит в получении диагностически достоверной информации. Нередко на достоверность получаемых результатов оказывают влияние интерферирующие вещества, в частности гемоглобин. Известно, что гемолиз может возникать в силу разных причин: ошибок на преаналитическом этапе — гемолиз in vitro и в результате патологических процессов в организме — гемолиз in vivo; при этом последний имеет важное диагностическое значение. Алгоритм для выявления происхождения гемолиза в сыворотке/плазме, предложенный проф. L. Thomas (2002 г.), предполагает, что в образцах с присутствием свободного гемоглобина должна быть определена концентрация гаптоглобина (Hp). Нр представляет собой белок, связывающий в организме человека свободный гемоглобин и снижающийся при внутрисосудистом гемолизе. Поэтому, возрастание свободного гемоглобина одновременно со снижением Hp в образце крови человека характерно для внутрисосудистого гемолиза. Цель исследования — оценить эффективность применения Hp в образцах пациентов с видимым гемолизом в качестве дифференциального теста для установления происхождения гемолиза: in vivo или in vitro. Материал и методы. В период с января по сентябрь 2015 г. в Межрайонной клинико-диагностической лаборатории Санкт-Петербургского консультативно-диагностического центра было отобрано 80 образцов с видимым гемолизом. Измерение индекса гемолиза (HI) и концентрации Hp в них было проведено на анализаторе cobas c 501 («Roche Diagnostics GmbH», ФРГ, «Hitachi High-Technologies Corporation», Япония). Референтные интервалы для Hp были взяты из оригинальной инструкции к набору. Данные результатов исследования были выгружены из лабораторной информационной системы PSM — АКЛ клиническая лаборатория (Roche — Акросс Инжиниринг), статистическую обработку проводили в программе Excel (Windows) и Statistica 12.0 (Stat Soft). Результаты. Медиана, 10-й и 90-й перцентиль концентрации Hp и индекса гемолиза (НI) в анализируемых образцах составили 1,08; 0,38—1,91 г/л и 106; 47—320 HI, соответственно. Коэффициент корреляции, вычисленный методом квадратов (методом Пирсона) r=0,02, свидетельствует об очень слабой связи. Это позволяет предположить, что изменение содержания Hp и свободного гемоглобина в исследованных образцах сыворотки пациентов являются, преимущественно, независимыми процессами. В 95% случаев визуальный гемолиз не был связан со снижением концентрации Hp в образце. В двух случаях снижение концентрации гаптоглобина (Нр1=0,18 г/л, Нр2=0,15 г/л) при высоком индексе гемолиза (HI1=205, HI2=84), соответственно, было связано с возрастом детей. У младенцев первого полугодия содержание Hp ниже, чем в старшем возрасте. Один пациент (Нр3=0,007, HI3=216) с трехлетним стажем хронического гепатита С имеет стабильное снижение Hp в динамике, связанное с угнетением белоксинтезирующей функции печени. Однако гемолиз в образце является следствием гемолиза in vitro. Только в одном случае низкий гаптоглобин (Нр4=0,07) и высокий индекс гемолиза (HI4=94) отражали гемолиз in vivo, связанный с талассемией. Полученные данные указывают, что только в 2,5% случаев изменения были клинически значимыми. Подход к происхождению гемолиза in vivo или in vitro с использованием Hp является клинически важным, но имеет низкую эффективность в связи с широким распространением ошибок при получении биоматериала.