В настоящее время эндотелин-1 (ЭТ-1) рассматривается как маркер и предиктор тяжести и исхода многих заболеваний, связанных с патологией сосудов. Например, определение содержания ЭТ-1 в плазме крови рекомендуют использовать в качестве лабораторного теста при сахарном диабете и у больных со стенокардией для установления тяжести сосудистых осложнений [2, 4, 11].

ЭТ-1 является одним из наиболее мощных вазоконстрикторов. Это олигопептид, который состоит из 21 аминокислоты и образуется из проэндотелина-1 под воздействием эндотелинпревращающего фермента [2, 34]. На секрецию ЭТ-1 оказывают влияние многочисленные физические (гипоксия) и гуморальные факторы, например цитокины [14, 29]. При этом ЭТ-1 сам усиливает продукцию цитокинов и тем самым может инициировать процесс воспаления [5, 6, 9]. Содержание ЭТ-1 регулируется главным образом на уровне мРНК эндотелинпревращающего фермента при участии протеинкиназы С и кальция [2, 11]. В эндотелиальных клетках ЭТ-1 не кумулируется. Связываясь с рецепторами гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, ЭТ-1 способствует увеличению в них содержания внутриклеточного кальция, что приводит к активации актомиозинового комплекса гладкомышечных клеток и их тоническому сокращению [19, 28]. ЭТ-1 также обладает митогенными свойствами за счет способности ускорять рост клеток различного гистотипа, потенцировать синтез и секрецию различных ростовых факторов, например фактора роста фибробластов, эпирегулина [10, 15].

В нормальных условиях формируется градиент концентрации ЭТ-1 в направлении от эндотелия к подлежащим клеткам сосудов [18]. Поэтому ЭТ-1 действует прежде всего как локальный медиатор эндотелиального происхождения. Концентрация ЭТ-1 в плазме крови обычно незначительна (0,26—0,5 фмоль/мл) [29]. Вместе с тем доказана роль ЭТ-1 как циркулирующего гормона, влияющего на показатели гемодинамики [28].

ЭТ-1 и чувствительные к нему рецепторы обнаружены не только в эндотелии и в гладких мышцах сосудов, но также в нейронах, глие и в мезенгиальных клетках почек, печени. В глазах ЭТ-1 и рецепторы к нему обнаружены в стекловидном теле, сетчатке, хориоидее, радужке, цилиарном теле, ЭТ-1 присутствует во влаге передней камеры [12, 13, 20, 34].

Имеются сведения о взаимосвязи между обменом эндотелинов и фибринолитической системой (ФС). Эндотелины регулируют содержание тканевого активатора плазминогена и ингибитора активатора плазминогена-1, участвующих в преобразовании плазминогена в плазмин [33]. При этом повышение уровня плазмина усиливает продукцию ЭТ-1 эндотелиальными клетками [21]. Известно, что факторы ФС участвуют в патогенезе заболеваний глаза, в том числе глаукомы. Так, обнаружено повышение содержания ингибитора активатора плазминогена-1 в водянистой влаге при первичной открытоугольной глаукоме (ПОУГ) [22]. Повышенный уровень тканевого активатора плазминогена и урокиназного активатора плазминогена способствует гибели ганглиозных клеток в сетчатке, т.е. развитию глаукомной оптической нейропатии [26].

Таким образом, в патогенезе нарушения регионарной микроциркуляции в сетчатке и развитии оптической нейропатии большая роль принадлежит эндотелинам и компонентам ФС. Вопрос об их взаимосвязи при офтальмопатологиях остается открытым.

Цель работы — изучить содержание эндотелина и плазминогена в слезной жидкости у больных сахарным диабетом и ПОУГ.

Обследованы 10 больных ПОУГ (1—2-я стадия), средний возраст 67±4,3 года, и 10 пациентов с пролиферативной диабетической ретинопатией (ПДР), средний возраст 57±4,7 года. В группу контроля вошли 11 здоровых добровольцев соответствующего возрастного диапазона. Исследовали кровь из локтевой вены и слезу, которую получали из обоих глаз с помощью фильтровальной бумаги.

У больных ПОУГ измерения проводили только в слезе, так как в литературе имеются сведения об отсутствии при данной патологии изменения содержания ЭТ-1 в крови [1, 17, 25, 32]. У больных ПДР исследовали слезу и сыворотку крови.

Определение содержания ЭТ-1 проводили с помощью иммуноферментного метода («Biomedica», Австрия).

Уровень плазминогена измеряли путем добавления стрептокиназы к исследуемым образцам, что приводит к образованию плазминоген-стрептокиназного комплекса, расщепляющего хромогенный субстрат For-Ala-Phe-Lys-pNa·Hbr (набор ХромоТех-Плазминоген, Россия). По скорости гидролиза нитроанилиновой связи хромогенного субстрата судили о концентрации плазминогена. Регистрировали изменение оптической плотности (поглощение) при длине волны 405 нм после добавления уксусной кислоты (двухточечный метод).

Все измерения проводили на планшетном анализаторе (LM 01A, «Immunotech», Чешская Республика).

Статистическую обработку полученных результатов проводили по программе Statistica. Достоверность различий определяли с помощью t-критерия Стьюдента.

В результате проведенного исследования у больных ПДР выявлено увеличение содержания ЭТ-1 и плазминогена в слезной жидкости. Показано достоверное повышение (р<0,003) в 3 раза содержания ЭТ-1 в слезной жидкости при ПДР (2,9±0,48 фмоль/мл) по сравнению с группой контроля (0,97±0,4 фмоль/мл) (рис. 1, а).

У больных ПОУГ уровень ЭТ-1 в слезе достоверно увеличивался в 2,7 раза (2,6±0,58 фмоль/мл; р<0,03) по сравнению с нормой (рис. 2).

Таким образом, полученные нами данные свидетельствует о значительном (в 2,5—3,0 раза) увеличении содержания ЭТ-1 в слезе у больных ПОУГ и ПДР. В то же время нами выявлена тенденция к повышению уровня ЭТ-1 в общем кровотоке. Другие авторы также отмечают повышение уровня ЭТ-1 при ПДР в слезной жидкости и в сыворотке крови [3, 8]. В доступной литературе мы не нашли сведений о содержании ЭТ-1 в слезной жидкости при глаукоме. Показано увеличение уровня ЭТ-1 в водянистой влаге у больных ПОУГ [31]. Видимо, локальному увеличению содержания ЭТ-1 способствует местная гипоксия и ишемия, характерные для ПДР и ПОУГ, усиливающие переход проэндотелина в ЭТ-1 [30]. Помимо вазоконстрикторного действия, ЭТ-1 запускает реакции гиперплазии, что может способствовать переходу непролиферативной ретинопатии в пролиферативную стадию [8]. Повышенное содержание ЭТ-1 в тканях и жидких средах глаза является одним из факторов развития оптической нейропатии при ПОУГ, так как приводит к ишемии и гипоксии зрительного нерва за счет ухудшения его кровоснабжения, что является причиной гибели ганглиозных клеток [1, 23, 24]. При этом ЭТ-1 усиливает образование NO, также способствующего апоптозу ганглиозных клеток сетчатки [16, 27].

Локальное повышение уровня плазминогена при ПДР, возможно, указывает на недостаточное его превращение в плазмин, что приводит к угнетению местного фибринолитического потенциала. Такие же изменения выявлены и другими авторами [3, 7]. Локальное увеличение содержания ЭТ-1 и одновременное снижение активности фибринолиза являются одними из важнейших причин нарушения микроциркуляции и микротромбоза сосудов в сетчатке при ПДР.

Таким образом, нами показано, что при заболеваниях глаз, в патогенезе которых важная роль принадлежит локальным нарушениям микроциркуляции, в слезной жидкости отмечается значительное увеличение содержания ЭТ-1. Измерение содержания в слезе ЭТ-1 может явиться дополнительным информативным и неинвазивным методом для прогноза, оценки тяжести и контроля лечения локальных микроциркуляторных нарушений в глазу.